在制作小鼠皮膚組織樣品的時(shí)候，會(huì)發(fā)現(xiàn)皮膚組織韌性特別高。皮膚富含纖維組織和彈性，要從這類(lèi)組織有效提取RNA是非常困難的，因此完全研磨這些組織是十分具有挑戰(zhàn)性的。傳統(tǒng)的人工或用手持式勻漿器來(lái)研磨不僅費(fèi)時(shí)，研磨后的效果也不盡人意比較差，RNA產(chǎn)量低且令樣本發(fā)熱,那么使用組織研磨儀會(huì)有什么不同的效果呢？
大、小鼠皮膚組織提取DNA、RNA是目前各高校實(shí)驗(yàn)室的一項(xiàng)難題。溫州醫(yī)科大經(jīng)過(guò)多個(gè)品牌試用比較，然后選擇了上海凈信研磨儀來(lái)處理小鼠皮膚組織。本次實(shí)驗(yàn)對(duì)象為小鼠去毛后處理過(guò)的皮膚，要求磨細(xì)一點(diǎn)，提高RNA的濃度，涉及到RNA提取還需要低溫研磨，因?yàn)橛刑崛∫海詼囟炔荒芴停駝t凍住液體無(wú)法研磨， 實(shí)驗(yàn)步驟：
1、準(zhǔn)備金屬適配器一套，離心管和研磨珠若干。
2、預(yù)冷模塊，把金屬適配器放到液氮或冰箱中預(yù)冷（不用的時(shí)候順手把模塊放入-20冰箱，即可省去預(yù)冷步驟）
3、取適量小鼠皮膚組織、研磨珠、提取液一起放入離心管中，每管加三到五顆研磨珠，蓋子蓋上。
4、將完成預(yù)冷后的金屬模塊取出，放入研磨儀中固定（適配器底部與軸的卡槽互相卡牢）放平后將離心管分別放入適配器對(duì)應(yīng)孔位，（注意平面配平，對(duì)稱(chēng)放樣）蓋上適配器蓋，旋緊螺帽。
5、設(shè)置好參數(shù)（根據(jù)組織類(lèi)型以及量微調(diào)），開(kāi)始研磨。
6、磨好后打開(kāi)儀器取出離心管，即可進(jìn)行后續(xù)實(shí)驗(yàn)。
 
上圖為2-3分鐘的研磨效果，已經(jīng)完全研磨完成。之前所有樣品都是人工處理，小鼠皮膚樣特別難磨，磨出來(lái)效果很差，RNA提不出來(lái)，所以選用凈信組織研磨儀代替人工處理。效率高，效果好，很好的解決了老師的問(wèn)題。 注意事項(xiàng)：
1、按照組織的種類(lèi)和量來(lái)選擇研磨珠能達(dá)到理想的實(shí)驗(yàn)效果，有不清楚的及時(shí)問(wèn)上海凈信銷(xiāo)售人員。
2、往金屬適配器里放離心管時(shí)注意平面配平，保證適配器壓蓋在水平線(xiàn)上。
實(shí)驗(yàn)選用儀器： 全自動(dòng)樣品快速研磨儀 JXFSTPRP-24
JXFSTPRP®系統(tǒng)與目前已有的其它樣品制備方法相比，具有通用性廣、靈活等性能優(yōu)點(diǎn)。該系統(tǒng)避免了研磨、勻漿、超聲波處理等傳統(tǒng)方法的費(fèi)力、耗時(shí)、低效等諸多缺點(diǎn)，可以高效、快速、穩(wěn)定地裂解并純化各種類(lèi)型樣品的核酸與蛋白。 |
新聞資訊