目前科研人的WB現狀就是干貨都懂,實驗狀況卻頻出。辛辛苦苦花時間制備的細胞卻遇到提取液檢測不到目的蛋白、目的蛋白信號弱 、轉膜效率低 、顯色或曝光后無條帶 、Western blot背景高且不均勻、非特異性條帶、條帶拖尾或變形等常見的問題。眾所周知,有效的樣品制備是影響 WB 實驗可重復性的重要因素。 近日,貴州醫科大學某實驗室就使用上海凈信冷凍研磨儀制備了人體胃癌細胞樣品提取蛋白做WB實驗。實驗結果非常成功,研磨效果也令老師非常滿意,對后續的實驗分析很有幫助。  實驗樣品:人體胃癌細胞; 實驗器材:冷凍研磨儀JXFSTPRP-CLN、研磨管、氧化鋯珠若干; 實驗步驟: 1.細胞沉淀,加緩沖液,提取液,離心重懸; 2.加入氧化鋯珠,與細胞沉淀物的比例1:1; 3.設置研磨參數,啟動。 實驗效果圖: 研磨前(未加研磨珠-加研磨珠-研磨后)  附:實驗儀器圖片凈信冷凍研磨儀JXFSTPRP-CLN  上海凈信JXFSTPRP-CLN冷凍研磨儀是一種快速、高效、制冷的研磨系統。它能在非常短的時間內將土壤、植物和動物的組織/器官、細菌、酵母、真菌、孢子、古生物標本等樣品完成研磨、粉碎、混合機細胞破壁。廣泛應用于生命科學、醫藥、生化、環境、地質、農業、林業、質檢、材料等領域。 |