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新聞資訊
ibidi雷萌提供多種解決方案優(yōu)化相差顯微鏡成像,避免彎液面
時間:2023-05-26 16:39:32? 點(diǎn)擊數(shù):332次

  想改善您的顯微鏡圖像嗎?您對自己的圖像總是這樣感到不滿嗎?別擔(dān)心,在這里ibidi雷萌將幫助您獲得精美的圖像!在這里,雷萌將向您展示彎液面的形成是如何干擾相位對比顯微鏡成像的。如何能獲得清晰且對比度良好的圖像。 

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相差成像

  到目前為止,相襯是生物光學(xué)顯微鏡中常用的方法。它是細(xì)胞培養(yǎng)和活細(xì)胞成像中成熟的顯微技術(shù)。當(dāng)使用這種廉價的技術(shù)時,無需預(yù)先固定或標(biāo)記,就可以在自然狀態(tài)下觀察活細(xì)胞。  

  未染色的活細(xì)胞幾乎不吸收光。光吸收不良導(dǎo)致圖像中強(qiáng)度分布的差異較小。這使得細(xì)胞在明場顯微鏡下幾乎不可見或根本不可見。當(dāng)光穿過細(xì)胞時,會發(fā)生小的相移,這是人眼看不到的。在相差顯微鏡中,這些相移被轉(zhuǎn)換成振幅的變化,可以觀察到圖像對比度的差異。然而,這種無標(biāo)記技術(shù)在很大程度上取決于光路中組件的正確對齊。這種對準(zhǔn)可能會受到自然發(fā)生的彎液面效應(yīng)的干擾,從而導(dǎo)致相襯變?nèi)酢! ?/p>

  相差顯微鏡要考慮的一個重要問題是彎液面,它是在氣液界面自然形成的。這種現(xiàn)象會顯著降低圖像質(zhì)量,尤其是在像標(biāo)準(zhǔn)96孔板這樣的小型培養(yǎng)孔中。由于彎液面而產(chǎn)生的衍射擾亂了光路內(nèi)相位環(huán)和相位板的正確對準(zhǔn)。  

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  左邊具有彎液面的光束路徑未對準(zhǔn),右邊是無彎液面的光路對準(zhǔn)正確,相位對比良好。  

  如何避免彎液面?  

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  ibidi開發(fā)出了多種解決方案很好地解決了這個問題——并保證相位對比圖像:  

  * ibidi μ-Slide 15孔3D載玻片和μ-Plate 96孔3D載玻片  

  * ibidi channel μ-Slides通道載玻片  

  * ibidi μ-Slides PH+  

  * ibidi μ-Dish 35 mm Quad四區(qū)塊 高壁培養(yǎng)皿  

  μ-Slide 15孔3D載玻片 (formerly μ-Slide Angiogenesis)和μ-Plate 96孔3D載玻片 (formerly μ-Plate Angiogenesis 96 Well)  

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  ibidi μ -Slide 15 Well 3D 和μ-Plate 96 Well 3D (下圖右)提供理想的細(xì)胞培養(yǎng)容器:  

  1)可獲得相差圖像;  

  2)一種獨(dú)特的幾何技巧,即“孔中孔”技術(shù),抑制了彎液面的形成,并在整個觀察區(qū)域產(chǎn)生了良好的相位對比。  

  而普通的細(xì)胞培養(yǎng)容器(下圖左):  

  1)氣液界面彎液面:大部分觀察區(qū)域相差較差。 

  2)凝膠表面的彎液面:不可能同時聚焦所有細(xì)胞。  

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  ibidi channel μ-Slides通道載玻片  

  ibidi channel μ-Slides通道載玻片為相差顯微鏡提供了理想的光學(xué)條件。培養(yǎng)細(xì)胞時,通道自下而上充滿培養(yǎng)基。這在幾何上抑制了彎液面的形成,并在整個通道中實(shí)現(xiàn)了相差。  

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  ibidi μ-Slides PH+  

  ibidi μ-Slides PH+(有2 Well Ph+、4 Well Ph+兩種規(guī)格)專為相差顯微鏡設(shè)計。每個孔中的特殊中間擋板可避免彎液面形成并確保了相差——無論孔的那個部分都能快速成像。  

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  使用μ-Slide 2 Well Ph+、4 Well Ph+可減少彎液面,增加對比度良好的細(xì)胞面積。這種良好的對比是由于中間擋板產(chǎn)生的平行光束路徑。  

  Ph+孔與標(biāo)準(zhǔn)孔的比較:Ph+孔無彎液面效應(yīng)  

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  ibidi μ-Dish 35 mm Quad四區(qū)塊 高壁培養(yǎng)皿  

  中心擋板提供相位對比度  

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  ibidi μ-Dish 35mm Quad四區(qū)塊高壁培養(yǎng)皿(左圖)居中的中間擋板減少了彎液面的形成,從而實(shí)現(xiàn)了相位對比光學(xué)。同時,這種Ph+特征有利于細(xì)胞的均勻分布。  

  就像ibidi μ-Slide 2 Well Ph+和μ-Slider 4 Well Ph+一樣,μ-Dish 35mm Quad四區(qū)塊高壁培養(yǎng)皿將細(xì)胞生長和高分辨率顯微鏡結(jié)合在一起,無論是使用相差顯微鏡還是熒光顯微鏡。  

  訂購信息:

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